Page 148 - 2019年10月第30卷第20期
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       （H-NMR）分析，发现测得的化学位移可以与其已知结                          方法的结合将越来越多地运用在合成多肽药物结构表
        构较好地对应，从而进一步对依替巴肽的一级结构进行                           征的研究方面。
        了确证。可见，多种分析技术相结合已成为复杂肽或长                           参考文献
        肽结构确证较常采用的分析手段。                                    [ 1 ]  王凤亮.非天然氨基酸在构象锁定多肽合成中的应用
        2.2 图谱处理及分析                                             [D].北京：中国科学技术研究院，2016.
            串联质谱法测定多肽序列时，所得到的质谱图既可                         [ 2 ]  王姗.热敏凝胶用于多肽与蛋白药物的研究进展[J].中国
        以手动进行分析，也可以通过仪器提供的相关软件进行                                新药杂志，2014，23（19）：2266-2270.
        分析。具体的谱图处理及分析方式要结合所分析样品                            [ 3 ]  程念.多肽药物长效化研究进展[J].中国新药杂志，2016，
        的结构、所采用的分析仪器以及具体的实验情况决定。                                25（22）：2574-2580.
        2.2.1  手动分析     经典的氨基酸质谱测序方法是在碎                    [ 4 ]  胡玉玺，蒋煜，韩天娇.制备工艺和过程控制对合成多肽
        裂谱图中观察这些离子，通过计算质量差来反推多肽序                                药物有关物质的影响[J].中国新药杂志，2017，26（18）：
                                                                2143-2148.
                             [46]
        列 [43-45] 。例如，盛龙生等 应用基质辅助红外激光解吸                    [ 5 ]  DU QS，XIEN Z，HUANG RB. Recent development of pe-
        质谱法（IR-MALDI/FTMS）分析九肽药物促黄体素释放
                                                                ptide drugs and advance on theory and methodology of
        激素类似物（LRH-A），获得了样品的相关碎片离子信
                                                                peptide inhibitor design[J]. Med Chem，2015，11（3）：235-
        息，并手动分析了所得到的系列碎片离子，根据相关碎                                247.
        片离子之间的质量差确定了氨基酸残基的连接方式。                            [ 6 ]  VLIEGHE P，LISOWSKI V，MARTINEZ J，et al. Synthe-
        2.2.2  借助相关软件分析          随着串联质谱从头测序软                    tic therapeutic peptides：science and market[J]. Drug Dis-
        件（如 PEAK、SMSNovo、RAID、UniNovo、Novor 等）的                 cov Today，2010，15（1/2）：40-56.
            [47]
        开发 ，研究人员在进行结构确证时可不依赖于已知数                           [ 7 ]  CRAIK DJ，FAIRLIE DP，LIRAS S，et al. The future of
        据库，在快速鉴定多肽序列同时还可以指定翻译后修饰                                peptide-based drugs[J]. Chem Biol Drug Des，2013，81
        位点  [48-49] ，这也使得串联质谱法成为多肽药物结构确证                        （1）：136-147.
        研究的首选方法之一。一些公司也推出了匹配串联质                            [ 8 ]  AYOUB M，SCHEIDEGGER D. Peptidedrugs，overco-
        谱仪器的商业软件，例如梁艳等 对还原后的阿托西班                                ming the challenges，growing business[J]. Chem Today，
                                   [38]
        样品进行 ESI-MS/MS 分析，用仪器上匹配的 MaxEnt 3                      2006，24（3）：46-48.
        软件对获得的二级质谱图进行处理，借助于 MasSeq 软                       [ 9 ]  聂彩辉，徐寒梅.多肽药物的发展现状[J].药学进展，
                                                                2014，38（3）：196-202.
        件标识出y型离子，从而可以解析m/z为98.73的肽段所
                                                           [10]  DANHO W，SWISTOK J，KHAN W，et al. Opportunities
        对应的氨基酸序列，并利用 MasSeq 软件中的编辑功能                            and challenges of developing peptide drugs in the pharma-
                                               [50]
        最终确证了阿托西班的一级结构。王红霞等 用纳升
                                                                ceutical industry[J]. Adv Exp Med Biol，2007，611（88）：
        电喷雾四极杆-飞行时间串联质谱分析了亮丙瑞林及
                                                                467-469.
        EPD 等样品，分别获得其二级质谱图，经仪器上匹配的                         [11]  王克全，徐寒梅.多肽类药物的研究进展[J].药学进展，
        MaxEnt 软件转化、结合 MasSeq 软件及其中的编辑功能                        2015，39（9）：642-650.
        推导出了样品的多肽序列。                                       [12]  孙立春.多肽药物的研究进展[J].新药研发，2014，35（5）：
            由此可见，串联质谱法在合成多肽药物结构确证中                              55-60.
        的应用广泛，不同的串联质谱有其不同优点，可结合分                           [13]  国家食品药品监督管理局.化学药物原料药制备和结构
        析对象的结构灵活选择合适的方法；对获得的有关质谱                                确证研究技术指导原则[S].2004-03-21.
        图进行解析也随着相关软件的开发及多种数据库的建                            [14]  FDA. Guidance for industry for the submission of chemis-
        立而越来越简便。                                                try，manufacturing，and controls information for synthetic
        3 结语                                                    peptide substances[EB/OL].（1994-11-01）[2019-03-22].
                                                                https：//www.fda.gov/drugs/guidancesdrugs/withdrawn-
            为了提高药效、延缓半衰期、降低副反应或改善其
        稳定性，很多新的多肽药物往往都要进行相关的化学修                                guidances-drugs.
                                                           [15]  国家食品药品监督管理局.合成多肽药物药学研究技术
        饰 [51-52] 。目前常用的Edman降解法主要是用于测定N端
                                                                指导原则[S].2007-10-23.
        不含有封闭及修饰氨基酸的多肽分子，而质谱法则适用
                                                           [16]  ALEKSANDER S，HAROLD R，ANITA S，et al. Control-
        于对Edman降解法无法分析的多肽药物，是一种强大的
                                                                strategies for synthetic therapeutic peptide APIs：part Ⅰ：
        肽测序工具。虽然串联质谱测序存在有时难以区分m/z                               analytical consideration[J]. Bio Pharm Inter，2014，27（3）：
        相近的氨基酸残基、部分离子缺失、内部或侧链断裂产                                16-21.
        生复杂的碎片离子，给图谱解析带来困难等缺点，但随                           [17]  LARISA C，WU FU，CHEN SAU，et al. Building parity
        着相关分析软件的不断完善及衍生化质谱技术的不断                                 between brand and generic peptide products：regulatory
        发展，质谱法在分析复杂的多肽药物分子及混合肽的结                                and scientific considerations for quality of synthetic pep-
        构中显示出了明显优势。质谱法或质谱法与其他分析                                 tides[J]. Inter J Pharm，2017，518（1/2）：320-334.


        中国药房    2019年第30卷第20期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20  ·2879  ·
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