Page 67 - 《中国药房》2024年19期
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S20）样品聚为一类。这表明浙江与江西产土茯苓所含                          4 可知，20 批土茯苓可聚为 3 类，其中 S1～S10 聚为一
          化学成分含量虽有一定差异但总体比较接近，而浙江、                           类、S11～S15 聚为一类、S16～S20 聚为一类，与 CA、
          江西产土茯苓所含化学成分含量与湖南、云南产土茯苓                           PCA结果一致。进一步以变量重要性投影（variable im‐
          差异较大。                                              portance projection，VIP）值大于 1 为筛选标准（图 5），从
                                欧氏距离                         8个成分中筛选出5-O-咖啡酰基莽草酸、落新妇苷、异落
                    0                  5              10              15               20               25
                                                             新妇苷、新落新妇苷为不同产地土茯苓质量差异的标
                   S1
                   S5
                   S3                                        志物。
                   S2
                   S4
                   S7                                                                               浙江
                   S9                                                  2                            江西
                   S8                                                                               云南
                  S10                                                  2                            湖南
                   S6                                                  0
                  S11                                                t[2]
                  S15                                                 －2
                  S13
                  S12                                                 －4
                  S14
                  S17                                                 －6
                  S20                                                  －15     －10       －5               0                                5                                                                   10
                  S16                                                                         t[1]
                  S19
                  S18                                            图4 20批土茯苓样品的PLS-DA得分散点图
                  图2 20批土茯苓样品的CA树状图
                                                                       2.0
          2.6.2 主成分分析                                                 VIP值  1.5
                                                                       1.0
              将 20 批土茯苓中 8 个成分的含量数据导入 SPSS                             0.5
                                                                        0
          25.0 软件中，以特征值与累计方差贡献率作为判断依                                           落新妇苷      黄杞苷    异黄杞苷  白藜芦醇
          据，计算主成分的特征值与方差贡献率，从而对主成分                                                异落新妇苷  新落新妇苷  新异落新妇苷
                                               [10]
          进行提取。以特征值大于 1 作为判断标准 ，可得前 2                                      5-O-咖啡酰基莽草酸
          个主成分的特征值分别为4.965、1.883，方差贡献率分别
                                                                                      成分
          为 62.06%、23.54%，累计方差贡献率达 85.60%，大于
                                                                       图5 20批土茯苓样品的VIP图
          85%，可以反映土茯苓的综合质量，故提取前2个主成分
          进行评价。同时，应用SIMCA 14.1软件，采用无监督模                      3 讨论
          式识别方法对 20 批土茯苓中 8 个成分的含量数据建立                       3.1 指标成分的选择与提取条件的优化
          主成分分析（principal component analysis，PCA）模型（图            研究表明，黄酮类成分为土茯苓中最主要的活性成
                                             2
          3），提取出前 2 个主成分的累计解释率 R X 为 0.856，累                 分，其中又以落新妇苷、新落新妇苷、异落新妇苷、新异
                    2
          计预测力 Q 为 0.676，两者均大于 0.5，表明所建立的模                   落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和白藜芦醇含量相对较高，
                      [10]
          型稳定性较强 。由图 3 可知，20 批土茯苓样品分布在                       且这些成分均具有良好的药理活性                [11―13] 。另外，也有研
          不同区域，表明不同产地样品间存在差异，其中 S1～                          究发现，有机酸类成分5-O-咖啡酰基莽草酸在土茯苓中
          S10、S11～S15、S16～S20 各自呈现一定的相关性，与                   含量也较高，且具有较好的抗氧化、抗癌、抗炎等活
                                                               [13]
          CA结果一致。                                            性 。故本研究选取上述8个成分作为含量测定的指标
                                                             成分。笔者还考察了不同提取溶剂（50%、70%、90% 乙
                   3                            浙江
                                                江西           醇）、超声时间（30、45、60 min）、溶剂体积（25、50、75
                   2                            云南
                   1                            湖南           mL）对土茯苓中各成分提取效果的影响，结果发现，以
                 t[2]  0
                  －1                                         50 mL 70%乙醇为提取溶剂，超声处理45 min，各指标成
                  －2
                  －3                                         分的提取效果最佳。
                  －4                                         3.2 色谱条件的优化与检测波长的选择
                    －8    －6     －4    －2         0           2            4           6
                                         t[1]                    本研究采用梯度洗脱方式对流动相洗脱程序进行
                 图3 20批土茯苓样品的PCA得分图
                                                             摸索优化，考察了不同流动相系统（甲醇-0.2% 乙酸溶
          2.6.3 偏最小二乘-判别分析                                   液 、乙 腈 -0.2% 乙 酸 溶 液 、甲 醇 -0.2% 甲 酸 溶 液 和 乙
              以20批土茯苓中8个成分的含量数据为变量，应用                        腈-0.2%甲酸溶液）对分离效果的影响。结果显示，以乙
          SIMCA 14.1 软件进行偏最小二乘-判别分析（partial                  腈-0.2% 甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱时效果最
          least squares discrimination analysis，PLS-DA），建立有监  佳，8 个成分的色谱峰与其相邻峰的分离度均大于 1.5。
          督模式识别的 PLS-DA 模型（图 4）。结果显示，模型拟                     本研究进一步采用二极管阵列检测器在190～400 nm范
          合度 R Y 为 0.905，模型解释率 R X 为 0.974，预测力 Q 为           围内对8个成分进行扫描，以考察不同检测波长对实验
                                     2
                                                      2
               2
                                                 [10]
          0.873，均接近于1，表明模型具有良好的稳定性 。由图                       的影响。结果显示，各成分在290 nm波长处吸收较强。
          中国药房  2024年第35卷第19期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 19    · 2381 ·
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