Page 66 - 《中国药房》2023年24期
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laceae、拟普雷沃氏菌属的相对丰度虽有所增加，但差异 本研究使用不同剂量的达原饮对模型小鼠进行干
均无统计学意义（P＞0.05）。与 MC 组比较，MDYY 组 预，发现小鼠肺部病理、肺组织炎症因子水平、血清中胃
小鼠毛螺菌属NK4A136组和丝状菌属相对丰度均显著 肠激素水平和T、B淋巴细胞百分比均得到显著改善，有
增加（P＜0.05 或 P＜0.01），未分类 Muribaculaceae 的相 效缓解了 RSV 感染引起的肺部损伤。但达原饮并没有
对丰度显著降低（P＜0.01），此外未分类的Clostridiales、 呈现明显的量效关系，这可能是由于高剂量达原饮苦味
拟杆菌属、另枝菌属、拟普雷沃氏菌属水平也呈现回调 较大，灌胃时小鼠比较抗拒，导致给药量不达标所致。
趋势，但差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果见图3。 肠道菌群可调节宿主的免疫反应，参与人体各系统
100 重要的生理功能，影响多种疾病的发生发展，被称为“人
90
80 类第二基因组”。在正常情况下，宿主与肠道微生物维
70 持着相对动态平衡；当肠道菌群失衡，会引发宿主屏障、
相对丰度/% 50 免疫等功能丧失，从而加重甚至诱发疾病 。本研究运
60
[13]
40
30
20 用 16S rDNA 技术发现，与 NC 组比较，MC 组小鼠的肠
10
0 道菌群丰度与多样性均有所增加。经中剂量达原饮干
NC MC MDYY 预后，小鼠肠道菌群的多样性及丰度均明显回调，表明
组别
图3 各组小鼠属水平下肠道菌群结构分析 该方能改善 RSV 寒湿郁肺证小鼠的肠道菌群紊乱。
BALB/c 小鼠的肠道菌群主要由四大菌门组成，其中以
3.4.4 LEfSe多级物种差异 拟杆菌门和厚壁菌门为主，还包括变形菌门和放线菌
LEfSe结果显示，NC组对群落结构影响较大的差异 [14]
物种有厚壁菌门、梭菌目、毛螺菌科等[线性判别分析 门 。本研究发现，MC 组小鼠肠道菌群的结构及丰度
[11]
（linear discriminant analysis，LDA）值＞4 ，下同]。MC 发生了显著变化。首先在门水平上，MC 组小鼠拟杆菌
[15]
门/厚壁菌门比值增大，这与 Groves 等 报道的 RSV 感
组中对群落结构影响较大的差异物种有拟杆菌纲、
Muribaculaceae、Muribaculum、产酸拟杆菌等。MDYY 染小鼠体内拟杆菌门相对丰度增加、厚壁菌门丰度相对
组中对群落结构影响较大的差异物种有 Lachnospira‐ 减少的结果一致。厚壁门菌属以抗性淀粉和膳食纤维为
ceae_UCG-006、瘤 胃 球 菌 属 Ruminococcus 等 。 结 果 底物，产生短链脂肪酸（short-chain fatty acids，SCFAs），
SCFAs不仅是维持肠道黏膜细胞功能的主要能量来源，
见图4。
[16]
对机体免疫系统也具有重要意义 。厚壁菌门产生的
SCFAs以具有抗炎活性的丁酸盐为主，从而影响免疫细
[17]
胞的迁移和黏附、细胞因子表达等信号通路的激活 。
因此，厚壁菌门丰度降低会造成肠道菌群失衡，影响机
体免疫力，造成病原清除障碍，使炎症持续存在，从而加
重呼吸道病毒疾病的发展。
在属水平上，中剂量达原饮能显著回调有益菌毛螺
菌属 NK4A136 组的相对丰度水平。既往研究发现，毛
螺菌属NK4A136组能够保护颗粒物或病原微生物引起
的肺损伤，其机制可能与调节免疫、减轻炎症及氧化反
[18]
应有关 。毛螺菌科是丁酸盐的主要生成者，丁酸可抑
制炎症反应，保护肠黏膜。毛螺菌属 NK4A136 组的增
[18]
加与亚精胺介导的肠道屏障功能增强相关 ，其在 MC
组小鼠体内呈低丰度表达，可能与模型小鼠的炎症状态
图4 LEfSe的LDA柱状图 有关。本研究认为，毛螺菌属 NK4A136 组可能在减轻
4 讨论 RSV引起的肺损伤中发挥了关键作用。
为了更加贴合 RSV 流行时的气候条件，符合“寒湿 本研究进一步分析了 NC 组、MC 组和 MDYY 组肠
疫”的中医证候表现，本研究采用了“寒湿造模+RSV 感 道菌群的多级物种差异，结果发现，MDYY 组的主要差
染”的方式建立 RSV 寒湿郁肺证小鼠模型。结果显示， 异物种有Lachnospiraceae_UCG-006和瘤胃球菌属。有
与 NC 组比较，MC 组小鼠肺组织有明显病变，血清中 研究报道，Lachnospiraceae_UCG-006 相对丰度与肺部
MTL 水平和肺组织上清液中 IL-1β、IL-6 水平均显著升 疾病密切相关，肺癌患者和小鼠粪便中 Lachnospira‐
高，血清中 GAS 水平显著降低。此外，模型小鼠外周血 ceae_UCG-006、瘤胃球菌属的相对丰度和 SCFAs 的含
中CD4 、CD8 T淋巴细胞百分比和B淋巴细胞百分比均 量均明显减少 [19―20] 。
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显著降低，这些特征与文献报道的“寒湿疫”动物模型相 综上所述，达原饮可能通过改善小鼠肺组织损伤、
[12]
吻合 。 减轻炎症、调节胃肠激素水平和淋巴细胞百分比来减轻
· 3004 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 24 中国药房 2023年第34卷第24期
