Page 63 - 《中国药房》2025年18期

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表3 各组大鼠结肠组织中相关 mRNA 及蛋白表达比 增加，进而引起腹痛或排便习惯改变等有关 。TNF-α、
较（x±s，n＝10） IL-1β、IL-6 是典型的促炎性细胞因子，主要由活化的巨
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组别 ZO-1 mRNA occludin mRNA p-p38 MAPK/p38 MAPK p-NF-κB p65/NF-κB p65 噬细胞产生，可介导炎症反应的上调 。紧密连接蛋白
对照组 1.02±0.11 0.92±0.10 0.24±0.03 0.19±0.02 是构成细胞间紧密连接的关键组分，包括 ZO-1 等胞质
IBS-D组 0.55±0.06 a 0.47±0.05 a 0.67±0.07 a 0.52±0.06 a
中药组 0.75±0.08 b 0.81±0.09 b 0.32±0.04 b 0.23±0.03 b 支架蛋白和 occludin 等跨膜蛋白。研究指出，ZO-1、oc‐
阳性对照药组 0.79±0.08 b 0.78±0.08 b 0.38±0.04 b 0.29±0.03 b cludin 是肠黏膜机械屏障形成的重要蛋白，可调节和维
激活剂组 0.22±0.03 b 0.17±0.02 b 0.85±0.09 b 0.79±0.08 b 持肠道通透性和细胞极性，选择性吸收营养和水分，并
中药+激活剂组 0.49±0.05 cd 0.42±0.05 cd 0.58±0.06 cd 0.49±0.05 cd
阻止细菌和病毒等病原体的入侵 。本研究结果显示，
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a：与对照组相比，P＜0.05；b：与IBS-D组相比，P＜0.05；c：与中药
IBS-D 组大鼠的粪便含水量和血清中 TNF-α、IL-1β、IL-
组相比，P＜0.05；d：与激活剂组相比，P＜0.05。
0.05）；与IBS-D组相比，中药组、阳性对照药组大鼠结肠 6 水平均较对照组显著升高，最小容量阈值和 ZO-1、oc‐
组织中 p38 MAPK、NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平均显 cludin mRNA 的表达均较对照组显著降低或下调，提示
著降低，而激活剂组大鼠结肠组织中p38 MAPK、NF-κB IBS-D大鼠腹泻及炎症反应明显，肠黏膜机械屏障受损，
p65蛋白的磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）；与中药组 肠道通透性增加。
相比，中药+激活剂组大鼠结肠组织中 p38 MAPK、NF- 中医治疗具有多靶点协同作用，在IBS-D治疗领域
κB p65 蛋白的磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）；与激 中独具优势。中医认为，IBS-D所致腹泻、腹痛的基本发
活 剂 组 相 比 ，中 药 + 激 活 剂 组 大 鼠 结 肠 组 织 中 p38 病机制是“肝郁脾虚”，其中肝郁指气机不畅、疏泄失职，
MAPK、NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平均显著降低（P＜ 脾虚指运化无权、湿浊内生，两者相互影响。黄芪建中
0.05）。结果见表3、图2。 汤由多味药材组成，被广泛用于临床IBS-D的治疗。方
中，桂枝、生姜可温中散寒；黄芪、大枣可补益脾胃，增强
p-p38 MAPK 41 kDa
脾脏的运化功能，改善脾虚导致的腹泻；甘草与芍药配
伍，可缓急止痛、调和肝脾；饴糖可温中补虚，缓急止痛；
p38 MAPK 41 kDa
诸药合用，共奏温中健脾、止泻、柔肝止痛之效 [17―18] 。此
p-NF-κB p65 65 kDa 外，研究指出，方中含有槲皮素、山柰酚、β-胡萝卜素、β-
谷甾醇等活性成分，具有抗炎、抗氧化等广泛的药理作
NF-κB p65 65 kDa [19]
用，可能是该方发挥药效的物质基础 。本研究结果显
示，经黄芪建中汤干预后，IBS-D 大鼠的粪便含水量、性
β-actin 42 kDa
状评分和血清炎症因子水平均显著降低，最小容量阈值
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 显著升高，结肠组织水肿及炎症细胞浸润均有所改善，
Ⅰ：对照组；Ⅱ：IBS-D组；Ⅲ：中药组；Ⅳ：阳性对照药组；Ⅴ：激活
剂组；Ⅵ：中药+激活剂组。 结肠组织中 ZO-1、occludin mRNA 的表达均显著上调，
图2 各组小鼠结肠组织中 MAPK/NF-κB 信号通路相 提示该方可改善IBS-D大鼠的腹泻症状，缓解内脏高敏
关蛋白表达的电泳图 性，抑制炎症反应，改善肠黏膜机械屏障功能。
4 讨论 MAPK信号通路在肠道屏障功能调节、炎症激活以
IBS 是临床上常见的消化系统疾病，IBS-D 是其中 及机体疼痛感知中具有重要作用，p38 MAPK 是该家族
最常见的亚型。IBS-D 的发病机制尚不清楚，但学界普 的重要成员，可被炎症因子、应激刺激等激活，通过调控
遍认为是结肠炎症反应、超敏反应、肠道微生物群紊乱、 多种mRNA的表达来改变肠道屏障功能及内脏敏感性，
胃肠动力异常和心理异常等多种因素共同作用的结 从而诱发IBS [20―21] 。NF-κB被证实可通过调控多条细胞
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果 。本研究通过乙酸灌肠+束缚应激的方式构建了 信号通路来发挥关键作用，其中p65作为NF-κB异源二
IBS-D 大鼠模型，结果显示，与对照组相比，IBS-D 组大 聚体的关键亚基，在静息状态下存在于细胞质中；当肠
鼠的粪便含水量、性状评分均显著升高，结肠组织水肿 道受到炎症刺激后，NF-κB p65将被释放入核，从而启动
及炎症细胞浸润明显增多，提示 IBS-D 大鼠模型构建 炎症相关基因的表达，导致肠道炎症和内脏高敏性的发
成功。 生，是 IBS-D 发展过程中的关键通路 [22―23] 。参考现有网
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IBS-D 发展的影响因素较多，其中内脏敏感性的异 络药理学挖掘结果 ，本研究基于 MAPK/NF-κB 信号通
常增加可引发肠道动力障碍和腹泻，是该病关键的病理 路对黄芪建中汤干预 IBS-D 的潜在机制进行了验证。
生理机制之一，故缓解内脏敏感性可有助于IBS-D相关 结果显示，IBS-D 大鼠结肠组织中 p38 MAPK、NF-κB
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症状的改善 。此外，炎症可能是 IBS-D 发展的另一因 p65 蛋白的磷酸化水平均较正常大鼠显著升高，提示激
素，有研究者在 IBS-D 患者体内发现了低度炎症的存 活的MAPK/NF-κB信号通路可能参与了IBS-D的发展；
在，推测可能与感染、肠道微生物群改变或肠道通透性 经黄芪建中汤干预后，大鼠结肠组织中 p38 MAPK、

中国药房 2025年第36卷第18期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 18 · 2277 ·