Page 60 - 《中国药房》2021年第9期

number of alveolar atrophy and collapse，alveolar wall thickening，lung consolidation，and a large number of inflammatory cell
infiltration could be seen in lung tissue. Compared with model group，the contents of TNF-α，IL-1β（except for low-dose group），
IL-6 and PGE2 in serum，as well as the expression of TNF-α（except for high-dose group），IL-1β，IL-6（except for low-dose，
high-dose groups）and PGE2 mRNA in lung tissue were decreased significantly in Jingulian capsule groups（P＜0.05 or P＜0.01）；
the W/D ratio of lung tissue was decreased significantly in Jingulian high-dose group（P＜0.05 or P＜0.01）；the expression of
phosphorylation level of NF-κB p65 protein in lung tissue of Jingulian medium-dose group were decreased significantly（P＜0.05 or
P＜0.01），while the expression of I κ B α protein was increased significantly （P＜0.05）；the alveolar structure was clear，the
alveolar wall was slightly thickened， and a small amount of inflammatory cell infiltration was seen in lung tissue.
CONCLUSIONS：Jingulian capsule has good anti-inflammatory effect on inflammatory model rats，the mechanism of which may
be related to the inhibition of NF-κB signal pathway.
KEYWORDS Jingulian capsule；Anti-inflammatory effect；Inflammatory cytokines；NF-κB signal pathway

炎症是机体对损伤因子产生的正常防御反应，机体 制，以期更好地指导其临床合理应用。
[1]
很多疾病均与炎症有关 ，如风湿性关节炎、哮喘、肺炎 1 材料
等，严重的炎症会导致多器官衰竭、危及生命 [2－3] 。目 1.1 主要仪器
前，治疗炎症的主要有非甾体类、糖皮质激素类药物，但 本研究所用主要仪器有：680型酶标仪（上海伯乐生
[4]
这类药物的不良反应较多，不适宜长期使用 。研究发 命医学产品有限公司），Water purifier型实验室专用超纯
现，中药在治疗炎症方面具有疗效较好、毒副作用小等 水机（沃特世科技上海有限公司），AE240型十万分之一
优点 。因此，开发抗炎类中药对临床治疗炎症具有重 电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司），Allegra
[5]
要意义。 64R 型低温高速离心机（美国 Beckman Coulter 公司），
金骨莲胶囊源于经典苗药组方，具有祛风除湿、消 TGL-16G 型 高 速 离 心 机（上 海 安 亭 科 学 仪 器 厂），
肿止痛的功效，为治疗风湿痹证的苗药独家品种，收载 DHP-9052 型恒温培养箱（上海捷呈实验仪器有限公
于《国家中成药标准汇编》 和《国家基本医疗保险和工 司），ZH-2型涡旋混合器（天津药典标准仪器厂），Nano-
[6]
伤保险药品目录》 。金骨莲胶囊由大血藤、八角枫、透 drop2000 型紫外-可见分光光度计（美国 Thermo Fisher
[7]
骨香、汉桃叶和金铁锁组方而成，其组方药味含有大血 Scientific 公司），Chemidoc XRS 型凝胶成像仪、CFX
藤素、八角枫总碱、汉桃叶有机酸等多种抗炎活性成 Connect型荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪（美国Bio-
分 。金骨莲胶囊前期基础研究薄弱，其研究主要集中 Rad 公司），DYY-6C 型电泳槽（北京六一生物科技有限
[8]
于临床应用方面，如治疗风湿性关节炎、骨关节炎、急性 公司），ECLIPSE CI型光学显微镜（日本Nikon公司）。
软组织损伤等 [9－10] ，但其抗炎作用机制尚不明确。 1.2 主要药品与试剂
相关研究发现，炎症的产生与多种炎症介质的失控 本研究所用主要药品与试剂有：金骨莲胶囊（贵州
性释放有关，这些炎症介质的释放主要受到核因子κB 益佰制药股份有限公司，批号 20190806，规格 0.25 g），
[11]
（NF-κB）调节 。NF-κB是一种存在于真核细胞内的转 LPS（美国 Sigma 公司，批号 039M4004V），地塞米松片
录因子，在细胞的炎症反应、免疫应答等过程中起到关 （浙江仙琚制药股份有限公司，批号 171007，规格 0.75
键性作用 。在结构上，NF-κB是一个二聚体，在活化的 mg），TNF-α 、IL-6、IL-1β 、PGE2 酶 联 免 疫 吸 附 试 验
[12]
细胞中最常见的 NF-κB 二聚体形式是 NF-κB p65 或 （ELISA）测定试剂盒（南京建成生物技术有限公司，批
p50。正常情况下，NF-κB与其抑制蛋白IκBα结合，以无 号分别为 20191111、20190430、20190905、20190621），
[13]
活性的三聚体形式存在于细胞浆中 ；当细胞受到外界 Trizol 试剂（日本 Takara 公司，批号 9109），苏木素-伊红
信号的激活时，NF-κB 与 IκBα发生解离并活化，活化的 （HE）染液（武汉市皮诺飞生物科技有限公司，批号
NF-κB迅速从细胞浆转移到细胞核内，并与相应基因上 10011），iScript cDNA Synthesis kit 反 转 录 试 剂 盒 、
的κB 位点结合，启动转录程序，引起肿瘤坏死因子α iTaq TM universal SYBR Green Supermix、ECL化学发光底
物（美国 BioRad 公司，批号分别为 170-8890、1725122、
（TNF-α）、白细胞介素 1β（IL-1β）、IL-6、前列腺素 E2
[14]
（PGE2 ）等炎症因子释放，造成炎症级联放大反应 。基 1705060），兔源磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）单克隆
于此，本研究采用腹腔注射脂多糖（LPS）制备炎症模型 抗体（中国Abways公司，批号CY5095），兔源NF-κB p65
[15]
大鼠 ，通过测定大鼠血清中 TNF-α等相关炎症因子的 多克隆抗体、兔源 IκBα多克隆抗体、鼠源β-actin 单克隆
水平、肺组织湿质量/干质量（W/D）比值，观察大鼠肺组 抗 体（中 国 ABclonal 公 司 ，批 号 分 别 为 ab16502、
织的病理学形态变化，检测肺组织中TNF-α等相关炎症 A19714、ab6276），辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫
因子的表达以及 NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平和 IκBα 球蛋白 G 抗体（二抗）、BCA 蛋白检测试剂盒（武汉伊莱
蛋白的表达水平，初步探讨金骨莲胶囊的抗炎作用机 瑞特生物科技股份有限公司，批号分别为 E-AB-1037、

·1078 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9 中国药房 2021年第32卷第9期